慢性肾病（CKD）是猫科动物中常见的疾病，其发病机制复杂，涉及肾小管、肾间质及肾小球的多重病理改变。然而，研究自然发生的CKD往往受到病程进展缓慢、个体差异大及合并疾病等因素的影响。因此，建立可靠的实验模型对研究CKD的发病机制及开发治疗方案具有重要意义。本文基于单次肾缺血事件在猫中引发CKD的实验研究，详细描述了该模型的建立方法和技术流程。
一、实验动物与准备
- 实验动物
- 选用健康成年雌性猫（约11个月大），体重约3.1 kg。
- 动物需为实验专用饲养，确保其健康状态和实验的可控性。
- 术前准备
- 动物术前禁食12小时。
- 给药镇静：采用肌肉注射方法给予氯丙嗪（0.01 mg/kg）、丁丙诺啡（0.04 mg/kg）和氯胺酮（7 mg/kg）。
- 诱导麻醉：使用异氟烷吸入麻醉并配合100%氧气维持麻醉状态。
- 术中支持
- 动物手术中通过静脉注射等渗盐水（0.9% NaCl），速率为10 mL/kg/h，确保液体平衡。
- 通过加热毯维持体温，避免低温对实验的干扰。
二、手术操作
- 肾动静脉阻断
- 动物麻醉后，被转移至无菌手术室。
- 切开右侧腹部，暴露肾脏并分离肾动脉和肾静脉。
- 使用血管夹对右侧肾动脉和静脉进行阻断，持续90分钟，以模拟急性肾缺血。
- 手术细节
- 保证对侧（左侧）肾脏的血液供应不受影响，以减轻动物术后全身并发症。
- 血管夹解除后，观察右肾的血流恢复情况，确认无明显异常后缝合腹壁。
三、术后护理
- 镇痛管理
- 在动物术后腹部放置透皮芬太尼贴片（25 mg/h），缓解术后疼痛。
- 根据术后不适评分，补充给予丁丙诺啡（0.03 mg/kg，口腔给药）。
- 监测指标
- 血清肌酐（SCr）、血尿素氮（SUN）和尿液比重（USG）在术后定期测量，监测肾功能变化。
- 肾小球滤过率（GFR）通过碘海醇清除率测定，分别在术前和术后3个月及6个月进行评价。
- 每月记录动物的体重和血压变化，评估全身健康状态。
四、组织学与病理学分析
- 取样与固定
- 在实验结束后（术后6个月），动物通过静脉注射戊巴比妥安乐死。
- 取出右侧缺血肾（实验肾）和左侧对照肾（健康肾），测量其重量和体积，并进行组织固定。
- 病理染色与评估
- 使用苏木精-伊红（H&E）、周期性酸-希夫反应（PAS）和天狼猩红染色分析肾组织的病理改变。
- 重点观察肾小管萎缩、间质纤维化和肾小球硬化等慢性病变指标。
- 通过图像分析软件量化组织中胶原蛋白的分布及间质纤维化的程度。
- 结果分析
- 对比缺血肾与对照肾在肾小球密度、萎缩小管数量、胶原蛋白积累等方面的差异。啊
- 统计学方法采用重复测量方差分析（ANOVA）或学生t检验，P值小于0.05视为显著性差异。
五、实验模型的意义与局限性
该模型通过单次急性缺血事件成功诱导了猫的慢性肾病特征，包括肾小管萎缩、间质纤维化及肾小球硬化。与自然发生的猫CKD类似，该模型展现了慢性病变的多样性和个体差异。
参考文献：
Brown, C. A., Rissi, D. R., Dickerson, V. M., Davis, A. M., Brown, S. A., & Schmiedt, C. W. (2019). Chronic renal changes after a single ischemic event in an experimental model of feline chronic kidney disease. Veterinary pathology, 56(4), 536-543.
